藥典委中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查指導原則已公示，島津解決方案來助力
發(fā)布時間:2024-12-12 閱讀次數(shù)：854次
導語
馬兜鈴酸（AAs）為硝基菲類有機酸類化合物。這類有機化合物天然存在于諸如馬兜鈴屬及細辛屬等馬兜鈴科植物中。其中馬兜鈴酸Ⅰ是馬兜鈴屬植物中毒性最強的成分。另有研究發(fā)現(xiàn)，不但馬兜鈴酸具有腎毒性，其代謝產物馬兜鈴內酰胺同樣具有腎毒性。
中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查指導原則標準草案發(fā)布
2024年12月6日，國家藥典委發(fā)布“關于中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查指導原則標準草案的公示”。
正文
指出馬兜鈴酸類物質成分的種類及藥材類別，提到本指導原則適用于中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查，提供某中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查示例方法。
以下內容引自藥典委網(wǎng)站公示稿。
附注
1、中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ的測定屬于毒性成分檢査范疇，測定方法可以參考本指導原則的方法，亦可對本方法進行合理優(yōu)化，但均需參照《中國藥典》2020 年版四部 9101分析方法驗證指導原則進行驗證。建議采用液相色譜-串聯(lián)質譜法對中成藥中馬兜鈴酸I進行檢查。實驗室應建立必要的質控手段，保證測定結果準確。
2、根據(jù)各品種馬兜鈴酸Ⅰ的含量情況，及儀器靈敏度試驗確定適宜的供試品取樣量及稀釋倍數(shù)。示例中成藥日服用量40g。但馬兜鈴酸毒性不等同于含有此類成分的中藥材、飲片及制劑的毒性，各生產單位及藥品上市許可持有人應加強研究，制定合理的限度。
3、本方法提供的色譜條件、監(jiān)測離子對測定條件等為參考條件，各實驗室可根據(jù)樣品處方干擾情況和所配置儀器的具體情況做適當調整、優(yōu)化。
4、進行樣品測定時，如檢出色譜峰的保留時間與對照品一致，在扣除背景后的質譜圖中，所選擇的 2 個監(jiān)測離子對均出現(xiàn)，且所選擇的監(jiān)測離子對峰面積比與濃度相當?shù)膶φ掌返谋O(jiān)測離子對峰面積比一致(相對比例 >50%，允許+20%偏差:相對比例20%~50%,允許+ 25%偏差:相對比例10 %~20 %,允許+30%偏差;相對比例<10%,允許±50%偏差)則可判斷樣品中存在馬兜鈴酸Ⅰ。如果不能確證，選用其他監(jiān)測離子對重新進樣確證或選用其他檢測方式的分析儀器來確證，如選用高分辨質譜等手段確證。
5、根據(jù)待測樣品處方和劑型特點可采用更為適宜的供試品溶液制備方法?；|效應是干擾分析結果準確性的重要因素之一，在分析方法考察中須高度重視。必要時，應建立適宜的供試品溶液凈化方法。
島津解決方案
針對于標準草案的發(fā)布及行業(yè)聚焦中成藥中馬兜鈴酸檢測的研究，島津快速應對，為馬兜鈴酸的檢測及研究提供整體解決方案。
分析儀器
耗材
? 馬兜鈴酸前處理專用小柱：SHIMSEN Styra AA小柱（60 mg / 3 mL；）
? 優(yōu)化技術填料，回收率好；
? 凈化效果優(yōu)
? 操作方便、快捷
? 產品有性價比
? 馬兜鈴酸分析色譜柱：Shim-pack Velox C18（1.8μm，2.1*100mm；P/N：227-32007-03）
? 馬兜鈴酸類物質異構體分析柱：Shim-pack Velox PFPP（1.8μm 2.1x100mm；R227-32019-03）
? 核殼技術填料，更高分離度，更快分析結果
? 更高靈敏度
? 優(yōu)異的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，確保數(shù)據(jù)的可靠性
應用案例 1
清肺止咳丸中馬兜鈴酸Ⅰ的檢測
1、 靈敏度與專屬性
2、線性范圍
馬兜鈴酸Ⅰ校準曲線
3、精密度實驗
0.4ng/mL和1ng/mL 重復性色譜圖
4、實際樣品檢測和回收率實驗
樣本實測：取市售清肺止咳丸樣品按本方法測定，檢測到馬兜鈴酸Ⅰ，含量為 1.35 ng/g(0.054 ng/mL)。準確度考察:在樣品中分別添加 10 ng/g(0.4ng/ml)濃度水平和 25 ng/g(1ng/mL)濃度水平馬兜鈴酸進行加標回收實驗，回收率分別為 105.4%和114.9%。
應用案例 2
復雜樣品人參再造丸中馬兜鈴酸Ⅰ的檢測
1、樣品凈化
通過對SHIMSEN Styra AA小柱進行活化平衡、上樣淋洗、洗脫，最后加水定容至5 mL，過0.22 μm濾膜，供 LC-MS/MS 分析。通過SHIMSEN Styra AA小柱的凈化，排除目標峰旁的雜質峰，也可消除基質干擾帶來的離子比率的偏差。
2、 不同色譜柱的響應差異對比圖
Shim-pack Velox C18的響應是島津前一代色譜柱的2.5倍（同等實驗室條件下），對比如下圖
3、加標回收率結果
以上案例，如需要詳細了解，可聯(lián)系島津獲取全文。
應用案例 3
UHPLC-MS/MS測定九味羌活顆粒中7個馬兜鈴酸類成分
7個馬兜鈴酸類成分的MRM色譜圖
難點解決：異構體分離
由于測定的馬兜鈴酸類成分的結構比較類似，尤其是AA-Ⅰ與AA-Ⅲ結構極其相似，因此存在相同結構碎片，在AA-Ⅲ的定量通道中AA-Ⅰ也會出現(xiàn)色譜峰，若2個結構很相似的成分在色譜分離時分離不開，在質譜進行定量分析時可能會出現(xiàn)假陽性結果。因此，本研究選用選擇性更強、對同分異構體有良好分離效果的Shim-pack Velox PFPP色譜柱。
1.馬兜鈴酸Ⅰ（馬兜鈴酸 A）；2. 馬兜鈴酸Ⅱ（馬兜鈴酸 B）；3. 馬兜鈴酸Ⅲ
參考文獻：
[1]聶黎行,王馨平,李靜,等.中藥材（飲片）中馬兜鈴酸的含量分析及初步風險評估[J].中國藥物警戒,2023,20(05):553-559.DOI:10.19803/j.1672-8629.20220175.
撰稿人：豐偉剛
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